微生物的实验室培养(高中生物)
我只能简单介绍一下你问的三个涉及面比较广的问题。
1.培养基是微生物生长和繁殖的物质和环境基础。培养基含有氮源、碳源、水、生长因子等。可分为固体培养基、液体培养基、天然培养基、合成培养基、选择性培养基等。不同的培养基有不同的作用,有的用于活化微生物,有的用于选择微生物,有的用于保存微生物。根据具体目的和微生物的种类,选择不同的培养基。此外,所选培养基中使用的营养物比例取决于具体需要。至于保存方法,有短期保存和长期冷冻保存,保存方法很多。你说的临时保存就是4摄氏度倾斜试管保存法,在倾斜试管培养基上标记微生物,然后4摄氏度保存。你需要培养基。还有几种不同的甘油保存方法。有的是无菌水+细菌和甘油按不同比例混合形成浓度为65,438+00% ~ 40%的甘油保存液,有的是培养基(液体培养基)+细菌和甘油按比例混合形成浓度为65,438+00% ~ 40%的甘油保存液,然后在-20摄氏度冷冻。保存期一般是几年。所以,培养基也是需要的。这只是众多媒体中的一小部分。先说到第一个问题。
2、有点晕,第二个问题比较复杂。你说的稀释涂布平板法主要用于细菌的分离纯化。当菌悬液浓度过高时,接种到培养基中会出现密集的菌落,菌落相互重叠,失去分离纯化的意义。如果菌悬液浓度太低,你涂在平板上的菌悬液里可能没有你需要的细菌。也不可能分离出目标细菌。
什么浓度适合你说一步一个脚印?你不知道,所以你只能用10倍,1000倍,10000倍稀释,然后用每个浓度的菌悬液涂在相应的平板上,这样才能保证会有一个合适的浓度,你想要的细菌能够被分离纯化。当然,如果一次性适当稀释,也是可以的,如果能隔离出纯单菌落也没人敢否定你,但是成功率不高,或者说比较难。这个方法也挺麻烦的,但是稀释也是一个很简单的操作。不知道你能不能理解这个?
3.第三个问题稍微好描述一点。原理:纯净水在-20摄氏度会形成冰晶,破坏细胞壁和细胞膜,杀死细菌。甘油不会形成冰晶,但可以维持细胞壁和细胞膜的完整性。同时,由于100%甘油不能混菌均匀,而且太粘,不流动,所以要稀释成10%-40%甘油,我们实验室一般用20%甘油终浓度进行保种。注意最终浓度是20%,不是20%。如果浓度低于15%或10%,也会有冰晶,破坏细胞壁和细胞膜。另一方面,细菌毕竟是细菌,不是高等生物。他们对逆境有很强的抵抗力。-20摄氏度不会杀死它们,只会抑制它们的活动,所以它们停止生长,进入类似休眠的状态,但当条件合适时,它们会继续繁殖。当然,甘油-20摄氏度低温保存的菌种,使用前要进行活化处理。注意,这是我前面提到的激活介质。它是一个有营养的环境,它的目的是唤醒休眠的细菌,恢复它们的活力。这从另一方面回答了你关于使用培养基的问题。还有活化细菌的作用。别说——20摄氏度都杀不死细菌。有些细菌能在100摄氏度下生存。当然,这样的细菌是极端微生物。
说了这么多,不知道你有没有认真看,有没有理解。别让我费那么大劲打那么多字,看一眼就好。~ ~ ~ ~而且如果你看懂了,希望你能分享给我。最近问了一些关于基因克隆的问题,用了很多,所以现在在挣分。。。谢谢你。