紫杉醇是从红豆杉植物中提取的最有效的抗癌制剂之一。目前生产紫杉醇的主要原料是红豆杉的天然树皮。
需要(1)限制酶和DNA连接酶来形成重组质粒。因为导入目的基因时氨苄青霉素抗性基因被破坏,四环素抗性基因没有被破坏,所以要在培养基中加入四环素,筛选出导入目的基因的顶芽细胞。这种培养基是选择性的。
(2)利用植物组织培养技术,对携带目的基因的红豆衬衫顶芽进行离体培养,并发育成苗。原理是植物细胞的全能性。愈伤组织形成后,由于遗传信息的不同实现,再分化后可以形成各种组织细胞。
(3)接种前,应将配制好的MS培养基用高压蒸汽灭菌,避免杂菌在上面快速生长,会消耗营养物质,部分杂菌会危害培养物的生长。生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要,培养基中应添加这两种植物激素。添加激素时,要控制好两种激素的浓度、使用顺序和用量比例。
(4)红豆杉顶芽离体切割成单个顶芽细胞时,通常的方法是酶解,需要的酶是果胶酶。
所以答案是:
(1)限制酶和DNA连接酶四环素用于筛选导入了目的基因的顶芽细胞。挑选
(2)通用遗传信息的实现方式不同。
(3)高压灭菌生长素和细胞分裂素?浓度、使用顺序和剂量比例
(4)果胶酶