如何使用海马XF进行分析?
在开始XF分析之前,将细胞接种到XF细胞培养微孔板的孔中。分析中使用了不含碳酸氢盐的介质。分析探针板的加药孔最多可添加四种药物,用于分析时的自动加药。首先,将分析探针板放置在分析仪中,以自动校准光学传感器。然后,将细胞培养板插入仪器。
通常,在通过给料口添加抑制剂、激动剂、底物或化合物之前,测量基线(基本)OCR和ECAR率三到四次。OCR以pmol/min报告,ECAR以mpH/min报告。然后,将预装载到探针板的定量给料口中的化合物依次气动添加到每个孔的培养基中。缓慢混合后,多次测量OCR和ECAR。
海马XF测量是一种非破坏性的测量方法,因此在每个孔中依次加入四种不同的药物时,可以重复测量同一细胞群的代谢率。
总分析时间一般为60至90分钟。XF分析完成后,其他类型的生物分析,如细胞活性,可以在同一块板上进行。为了维持正常的细胞生理功能,使用温度控制系统将细胞环境维持在37℃(或其他预设温度)。