获得微生物纯培养物的方法和特点
I .固体培养基的分离
1,稀释倾倒板
特点:菌落分离比较均匀,微生物计数结果比较准确。但操作相对麻烦,热敏菌有时容易烫死,严格需氧菌固定在培养基中也可能受影响。
2、涂布平板法
特点:操作比较简单,是常用的套路方法。但有时某些部位的菌落会因为涂布不均匀而无法分离,所以在计数微生物时要特别注意稀释和涂布过程的操作,否则不容易得到准确的结果。
3、平线法
特点:操作简单,多用于现有纯培养物的确认和再分离。
应用:这三种方法可用于所有能在固体培养基表面形成菌落的微生物的纯培养和分离。此外,通过选择合适的选择平板和培养条件,可以直接分离具有特定生理特征的各种微生物。结合厌氧罐或厌氧手套箱技术,这三种方法也可用于获得各种厌氧菌的纯培养物。
4、稀释摇管法
特点:稀释倒置平板法的一种改良形式,但由于菌落形成于琼脂柱的中间,因此相对难以观察和挑选。
应用:在没有专业厌氧操作设备的情况下,进行严格的厌氧菌分离观察。
第二,分离液体培养基
1,稀释法
特点:工作量大,能否获得纯文化取决于统计推测。
应用:不能或不易在固体培养基上生长的微生物的纯培养分离或定量统计。
2.增殖培养
特点:一般不可能直接获得微生物的纯培养物。在自然环境中原本是少数的微生物通过增菌培养大量增加后,需要用平板法分离检测相应的微生物纯培养物。
应用:
(1)根据一种微生物的特殊生长要求,该微生物被有效地从自然界中分离出来;
(2)分离培养能在科学家设计的特定环境中生长的微生物,虽然我们不知道在这种特定环境中能生长什么微生物。
第三,微操作
单细胞(孢子)采摘
特点:分离过程直观可靠,但对仪器和操作技术要求高,多限于高度专业化的科研。然而,所选微生物的单细胞或孢子需要在固体或液体培养基中培养以获得其纯培养物。
应用:直接从样品中分离出所需的微生物细胞或孢子,获得其纯培养物。