动物细胞在培养条件下有什么生理特征?
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细胞培养是指细胞在体外生长,动物细胞在个体细胞培养过程中不再形成个体。
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概念
动物细胞培养(Animalcellculture)是将动物体内的相关组织取出,分散成单个细胞(使用胰蛋白酶或胶原酶),然后放入合适的培养基中,让这些细胞生长增殖。
简介
1.动物细胞培养液的成分:体外细胞培养所需的营养物质与体内基本相同,例如需要糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等。将细胞所需的上述物质根据其类型和所需量严格混合而成的培养基称为合成培养基。因为动物细胞生存的内环境中还存在一些成分,所以需要添加动物血清来提供与体内相似的环境。所以在使用合成培养基时,通常需要添加一些血清、血浆等天然成分。[1]
2.动物细胞培养基的特点:液体培养基,通常含有动物血清。
3.动物细胞培养的条件:
①无菌无毒环境:对培养液及所有培养器皿进行消毒,通常在培养液中加入一定量的抗生素,防止污染。此外,培养基应定期更换,以清除代谢物,防止细胞代谢物的积累对细胞本身造成伤害。
②营养素:无机物(无机盐、微量元素等。)和有机物质(糖、氨基酸、生长促进因子等。).
血清和血浆,但血清和血浆都不是营养物质。
③温度和pH值(36.5±0.5 ℃℃, 7.2 ~ 7.4)
④气体环境(95%空气和5% CO 2的混合气体)
其中,5%CO2气体用于保持培养液的pH值稳定。
3.基本过程
取动物胚胎或幼小动物的器官和组织。将材料切块,用胰蛋白酶(或胶原酶)处理(消化)形成分散的单细胞,将处理后的细胞转移到培养基中,制成一定浓度的细胞悬液。悬浮液中分散的细胞会很快附着在瓶壁上,成为细胞粘附物。当贴壁细胞分裂生长到相互接触时,细胞会停止分裂增殖,出现接触抑制。此时,接触抑制的细胞需要再次用胰蛋白酶处理。然后制备一定浓度的细胞悬液。另外,原代培养是取出体外后立即进行的细胞和组织培养。当细胞从动物和植物中生长迁移出来,形成生长晕并增加时,科学家再进行传代培养,即将原代培养的细胞分成几份,接种到几份培养基中,使其继续生长增殖。通过一定的选择或纯化方法,从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称为细胞系。培养50代以上时,大部分细胞已经老化死亡,但也有部分细胞改变了遗传物质,具有无限传代的特性,即癌变。此时的细胞称为细胞系。